使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragement length polymorphism，PCR-RFLP)法和直接测序法检测各肾移植受者的CYP3A5*3基因分型[11]。

    1.5.1 DNA的提取 将留取检测TAC血药谷浓度的剩余全血样本置于EDTA-K2抗凝管中，于2～4 ℃冰箱中保存，8 h后转移至-20 ℃冰箱中，冷冻；标本存放时间超过1个月后，再转移至-80 ℃冰箱中。按血液标本DNA提取试剂盒(大连宝生物工程有限公司)说明书提取DNA。

    1.5.2 引物设计 根据CYP3A5*3(rs776746)基因的目标序列和所选择的多态性位点，采用Sequenom Mass- ARRAY Assay Design 3.1软件(美国Sequenom公司)，由上海欧易生物有限公司设计、合成多重PCR特异性扩增引物和特异性延伸引物：5′ -ACTGCCCTTGCAGC- ATTTA-3′(正向)、5′ -CCAGGAAGCCAGACTTTGA-3′ (反向)，引物长度为393 bp。

    1.5.3 PCR反应体系和扩增条件 反应体系含DNA模板1 μL ......